多層囊泡 (MLV) 的制備

以下是用于制備脂質(zhì)體的凍干（冷凍干燥）脂質(zhì)混合物的方案的簡(jiǎn)要概述：

1. 將脂質(zhì)溶解在氯仿中。

2. 以適當的比例混合脂質(zhì)。

3. 使用干燥氮氣流小心蒸發(fā)有機溶劑。

4. 將脂質(zhì)混合物重新懸浮在環(huán)己烷中。如果混合物未全部溶解在環(huán)己烷中，則添加少量乙醇（環(huán)己烷體積的 1-2%）。不要使用過(guò)多的乙醇，因為過(guò)量的乙醇不會(huì )使溶液凍結。

5. 使用干冰冷凍環(huán)己烷溶液。

6. 快速將冷凍混合物置于高真空系統（凍干系統）上。一般來(lái)說(shuō)，“室內真空"系統對于這個(gè)過(guò)程來(lái)說(shuō)不夠強大。樣品應保持冷凍狀態(tài)直至全部干燥；如果樣品開(kāi)始解凍，則可能是真空不夠強，或者存在太多乙醇。解凍的樣品不會(huì )產(chǎn)生白色粉末，并且可能會(huì )從小瓶中隆起或起泡。

7. 將樣品放在真空系統上 3-5 小時(shí)（取決于使用的環(huán)己烷量）或直到樣品全部干燥（從真空中取出時(shí)，小瓶摸起來(lái)或環(huán)己烷的氣味不應感覺(jué)冷）。注意：這會(huì )產(chǎn)生干燥的白色粉末，很容易懸浮在水中。另一種方法是使用適當的水性緩沖液重新懸浮通過(guò)蒸發(fā)氯仿而產(chǎn)生的脂質(zhì)膜。

8. 將脂質(zhì)混合物懸浮在水性緩沖液中（緩沖液溫度應高于脂質(zhì)的相變溫度），并讓混合物在脂質(zhì)的相變溫度以上水合 30-60 分鐘（偶爾渦旋）。該過(guò)程產(chǎn)生大的多層囊泡（LMV 或 MLV）。對于要包埋的水溶性化合物，遵循相同的方案，不同之處在于將化合物溶解在用于重構干脂質(zhì)的水性緩沖液中，并且通過(guò)凝膠過(guò)濾除去外部化合物（未封裝的）。

參考

Frank Szoka, Jr. 和 Demetrios Papahadjopoulos，(1980)，“脂質(zhì)囊泡（脂質(zhì)體）的比較特性和制備方法"，Ann。生物物理學(xué)牧師。生物工程。，9：467-508。