ATCC細胞復蘇和培養的有關(guān)說(shuō)明

　　ATCC細胞的復蘇和培養操作：

　　1.準備好細胞培養皿或細胞培養瓶，及產(chǎn)品說(shuō)明推薦的相應細胞培養基。并在37℃水浴中預先溫熱細胞培養基。

　　2.小心取出裝有細胞的凍存管，保持管蓋擰緊，將凍存管蓋以下的部分置于37℃水浴中并輕微的晃動(dòng)以幫助解凍。解凍過(guò)程應該盡快，大約短于2分鐘或待后一塊小冰晶體剛融化，就應將細胞凍存管取出水浴。

　　3.在從水浴中取出的細胞凍存管表面噴灑70%乙醇配制的消毒劑，用無(wú)菌紙巾或紗布試干。之后的操作步驟都應該遵循在無(wú)菌條件下生物安全柜中嚴格操作。

　　4.小心擰開(kāi)凍存管的頂部，將管內容物用1ml移液槍轉移到含9毫升培養基的無(wú)菌離心管中。離心5到7分鐘(125×g)，小心吸去上清液以去除抗凍劑(二甲基亞砜)，避免丟失細胞沉淀。將細胞沉淀重懸于配好的*培養基中。將細胞懸液轉移到培養容器，輕輕搖晃使細胞均勻的分布。生長(cháng)較慢的細胞株可重懸于5-8ml培養基并轉移到T25培養瓶。生長(cháng)較快的細胞株可重懸于12-20ml培養基并轉移到T75培養瓶。

　　5.將細胞培養容器置于細胞培養箱，在溫度37℃，二氧化碳濃度5%的培養條件下進(jìn)行孵育。細胞培養24小時(shí)后應在顯微鏡下觀(guān)察細胞形態(tài)和生長(cháng)狀況。