Chrono-log血小板試劑操作及結果判定解讀

　　對于血小板的抗體篩檢可將機采三人份新鮮O型血小板血漿混合均勻，用生理鹽水調整血小板濃度為100-200*109個(gè)/L，將血小板加入反應板孔中央，每孔50µl（注意：移液器槍尖不要觸碰反應板底部和周邊）。

　　具體操作流程如下：

　　1.50g離心5min。用洗液洗滌反應板3次，每次靜止放置半分鐘，以除去未與反應板上包被的血小板單克隆抗體結合的血小板。

　　2.向每個(gè)反應孔中加入2滴（100µl）低離子介質(zhì)，并向相應的孔中分別加入1滴（50µl）待檢患者血清（血漿）、陰性、陽(yáng)性對照。

　　3.37℃水浴孵育30min。用洗液洗滌反應板5次（方法同上）。

　　4.立即加入1滴（50µl）抗人IgG試劑和1滴（50µl）指示細胞，振動(dòng)混勻。

　　5.200g離心5min。

　　6.肉眼判讀結果。將機采三人份新鮮O型血小板血漿混合均勻，用生理鹽水調整血小板濃度為100-200*109個(gè)/L。同時(shí)將供者和受者富含血小板血漿3000rpm 5min離心，使血漿和血小板分離，移出上層血漿至另一試管中備用，用生理鹽水將血小板調整至上述濃度。將血小板分別加入標記好的反應板孔中央，每孔50µl。

　　7.50g離心5min。用洗液（蒸餾水30倍稀釋?zhuān)┫礈旆磻?次，每次靜止放置半分鐘，以除去未與反應板上包被的血小板單克隆抗體結合的血小板。向每個(gè)反應孔中加入2滴（100µl）低離子介質(zhì)，并向相應的孔中分別加入1滴（50µl）供受者血漿陰性、陽(yáng)性對照。

　　8.37℃水浴孵育30min。用洗液洗滌反應板5次（方法同上）。立即加入1滴（50µl）抗人IgG試劑和1滴（50µl）指示細胞，振動(dòng)混勻。

　　9.200g離心5min。肉眼判讀結果。

　　10.實(shí)驗結果判定方法：

　?、訇?yáng)性結果：指示細胞在反應板底部平鋪，形成細胞層；

　?、陉幮越Y果：指示細胞在反應板底部中央形成細胞聚集。