如何檢測ATCC細胞增殖情況呢？

　　檢測DNA合成法是目前檢測ATCC細胞增殖準確可靠的方法，常用的方法有：

　　1.3H-胸腺嘧啶核苷滲入法(3H-TdR)

　　胸腺嘧啶核苷(TdR)是DNA合成的前體物，處于S期的細胞不斷地攝取TdR用以合成DNA。3H-TdR摻入法是將被放射性標記的3H-TdR摻入DNA合成期的細胞，細胞內3H-TdR摻入量的多少可客觀(guān)反映細胞復制DNA能力的大小，從而問(wèn)接了解細胞增殖情況。通過(guò)檢測H放射活性即可反映DNA含量。

　　2.BrdU檢測法

　　BrdU中文全名為5-溴脫氧尿嘧啶核苷，為胸腺嘧啶的衍生物，可代替胸腺嘧啶在DNA合成期(S期)摻入，而后利用抗BrdU的抗體耦聯(lián)不同的酶，加入不同發(fā)光特性的底物，然后再通過(guò)比色法、化學(xué)發(fā)光檢測或熒光信號檢測底物強度等步驟，反映BrdU的摻入量。該方法不需要再和放射性物質(zhì)打交道。

　　3.EdU檢測法

　　BrdU雖然解決了接觸同位素的問(wèn)題，但該方法需要變性DNA后才能與抗體結合，但這就破壞了DNA雙鏈結構，對某些后續或同時(shí)進(jìn)行的試驗，如其他染料的結合染色有影響?，F在有一種新的檢測方法能避免這種情況的發(fā)生-EdU檢測。EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷)也是一種胸腺嘧啶核苷類(lèi)似物，但其連有的炔羥基團在天然化合物中很少見(jiàn)，在細胞增殖時(shí)能夠插入正在復制的DNA分子中，基于EdU與染料的共軛反應可以進(jìn)行高效快速的細胞增殖檢測分析，可以有效地檢測處于S期的細胞百分數。與傳統的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比，更簡(jiǎn)單、快速、準確。