細胞凍存和復蘇常見(jiàn)問(wèn)題！

DMSO產(chǎn)品咱就不多說(shuō)了，什么品牌都有，只要是選擇細胞培養級別的，效果應該差不多。不過(guò)我用的是MP Biomedicals二甲基亞砜（DMSO），效果還可以。

對于胎牛血清的選擇就要相對謹慎了，市面上胎牛血清品牌可以說(shuō)是魚(yú)龍混雜，剛看過(guò)新聞的客戶(hù)就會(huì )知道，高仿產(chǎn)品橫行。慎重起見(jiàn)，給大家推薦CellMax品牌胎牛血清，目前有澳洲血清（庫存緊張）和中國血源胎牛血清可供大家試用，購買(mǎi)。

細胞凍存和復蘇需要注意哪些呢？

1、細胞本身的狀態(tài)

一般情況下細胞的復蘇還與原代細胞的活性有關(guān)，如果要凍存的細胞懸液本身活性不高的話(huà)，后面復蘇的存活率也不高。

2、凍存細胞數量要足夠

無(wú)論你再怎么小心，細胞在冷凍和復蘇的時(shí)候都是最脆弱的，總會(huì )死掉一批。所以，一開(kāi)始就要保證凍存細胞的數量足夠。

3、慢凍快融

一般情況下，細胞凍存時(shí)要遵循“慢凍快融"的原則。標準的降溫速度是1-2℃/min ，當溫度到達-25℃，降溫速度可加快至5-10℃/min，到-80℃可直接入液氮。有些實(shí)驗室是梯度凍存：4度，-20，-80，液氮，依次凍存。而復蘇速度越快越好。從液氮罐里取出來(lái)之后，迅速放在37°C水浴中，盡快融化

4、注意安全

細胞凍存和復蘇是細胞培養技術(shù)里面最容易出事的部分。凡是和液氮接觸的操作，注意戴保護眼鏡和手套。注意：復蘇的時(shí)候，在水浴中搖搖動(dòng)的時(shí)候會(huì )有爆炸的可能性。另外， DMSO是有毒致癌的。接觸的時(shí)候一務(wù)必要帶好手套。

5、做好標記

對于凍存細胞，一定要做好標記。如：細胞名稱(chēng)、代數和凍存日期。特別是公共實(shí)驗室，更要做好標記，避免找不到自己的細胞。

6、DMSO是否去除

由于DMSO是一種有毒致癌物質(zhì)。那么，解凍之后，應不應該去除凍存液中的DMSO呢？答案是no。除了極少數特別注明的對DMSO敏感的細胞外，99%的細胞都不需要去除DMSO。后面細胞培養中頻繁換液會(huì )慢慢去除掉DMSO。