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creative-enzymes 熒光酶的測定

發(fā)布時(shí)間: 2024-02-29  點(diǎn)擊次數: 170次

 


Creative Enzymes提供高質(zhì)量的生物分析服務(wù)和合同研究,專(zhuān)門(mén)從事酶活性分析,滿(mǎn)足制藥、生物技術(shù)和診斷行業(yè)客戶(hù)的需求。多年來(lái),Creative Enzymes一直是熒光酶檢測領(lǐng)域經(jīng)驗豐富的公司。我們的測量能力廣泛,涵蓋各種酶,包括氧化還原酶、轉移酶、水解酶、裂解酶、異構酶和連接酶。在解決具體問(wèn)題、優(yōu)化操作以及酶活性測量方法開(kāi)發(fā)的過(guò)程中,我們始終與客戶(hù)密切合作。

熒光是一種發(fā)射現象,其中吸收輻射的波長(cháng)始終低于發(fā)射(熒光)波長(cháng)(能量較高)。熒光酶測定利用產(chǎn)物底物熒光光譜的差異來(lái)測量酶反應(圖 1)。吸收光后,基態(tài) (S 0 ) 的熒光團被激發(fā)到更高能量的單線(xiàn)態(tài)水平。在皮秒時(shí)間尺度內發(fā)生的快速熱化使受激分子處于第一激發(fā)態(tài) (S 1 )的很低振動(dòng)能級。在系統發(fā)射光子后衰減回到基態(tài)之前,這種激發(fā)單線(xiàn)態(tài)可以保持很短的時(shí)間(納秒量級)。由于這種激發(fā)到基態(tài)躍遷的能量通常比激發(fā)過(guò)程的能量低,因此發(fā)射的波長(cháng)通常比激發(fā)的波長(cháng)更長(cháng)。這種波長(cháng)差異稱(chēng)為斯托克斯位移。實(shí)際上,所有熒光數據都可以通過(guò)五個(gè)參數之一來(lái)描述:激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、量子產(chǎn)率、熒光壽命以及發(fā)射的各向異性或偏振。

Perrin-Jablonski 圖。 S0 是基態(tài),而 S1 和 S2 是電子激發(fā)態(tài)。圖 1: Perrin-Jablonski 圖。S 0是基態(tài),而S 1和S 2是電子激發(fā)態(tài)。
參考文獻: Eccleston JF,Hutchinson JP,Jameson D M。藥物化學(xué)進(jìn)展,2005,43:19-48。

熒光測定廣泛用于確定酶反應的動(dòng)力學(xué)機制,也用于配置高通量篩選的動(dòng)力學(xué)測定。要使用基于熒光的測定進(jìn)行測量,反應需要從非熒光底物形成熒光產(chǎn)物,反之亦然。第一種情況的一個(gè)例子是在水解酶測定中使用非熒光試鹵靈丁酯作為底物,其中酯鍵的酶裂解產(chǎn)生高熒光試鹵靈。后者的一個(gè)例子是涉及將 NAD(P)H 氧化為非熒光 NAD(P) +的任何酶反應。熒光共振能量轉移 (FRET) 也可用于酶測定,其中酶促反應改變底物中兩個(gè)熒光團的距離或方向,從而改變觀(guān)察到的供體或受體的熒光強度。

熒光酶測定通常比分光光度測定靈敏得多,但可能會(huì )受到雜質(zhì)造成的干擾以及許多熒光化合物在光照下的不穩定性。在當前階段,對通??蓮娜祟?lèi)患者獲得的組織、細胞或液體的小樣本進(jìn)行診斷酶評估的數量不斷增加,這些測定的高靈敏度特別有價(jià)值。熒光測定還特別適合反應混合物的小型化。通過(guò)這種方式,可以進(jìn)一步大幅提高靈敏度,從而減少對酶和熒光底物樣品的需求。隨著(zhù)非常昂貴或稀缺的熒光底物的出現,后者的保護變得重要。

憑借最新的知識和先進(jìn)的儀器,Creative Enzymes有信心為客戶(hù)提供可靠的熒光酶檢測,提供所有類(lèi)型酶活性水平的量化。通過(guò)不斷追求好的服務(wù),Creative Enzymes贏(yíng)得了數以萬(wàn)計客戶(hù)的信任??傮w而言,Creative Enzymes致力于實(shí)現最高的客戶(hù)滿(mǎn)意度,并不斷改進(jìn)服務(wù)和質(zhì)量管理。

 

北京和一生物科技有限公司專(zhuān)業(yè)代理antibodiesinc全系列產(chǎn)品,專(zhuān)營(yíng)進(jìn)口生物試劑,科學(xué)儀器,實(shí)驗消耗品,化工原料及藥物中間體等。公司與諸多國外品牌簽下代理,sigma、santa、RD、Abcam、CST、toxin、streck、Biolegend、ebioscience、saracare、polyplus、Beyotime、Novus、moltox等,能為廣大科研用戶(hù)提供數萬(wàn)種試劑、儀器和實(shí)驗消耗品。

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