ATCC細胞的具體計數操作教學(xué)

　　3.計算板四大格細胞總數，壓線(xiàn)細胞只計左側和上方的。然后按公式計算：

　　細胞數/mL=四大格細胞總數/4×104。

　　說(shuō)明：公式中除以4，因為計數了4個(gè)大格的細胞數。公式中乘以104因為計數板中每一個(gè)大格的體積為：

　　1.0mm（長(cháng)）×1.0mm（寬）×0.1mm（高）=0.1mm³，而1ml=1000mm³。

　　注意：鏡下偶見(jiàn)有兩個(gè)以上細胞組成的細胞團，應按單個(gè)細胞計算，若細胞團10%以上，說(shuō)明分散不好，需重新制備細胞懸液。

　　ATCC細胞計數要點(diǎn)：

　　1.進(jìn)行細胞計數時(shí)，要求懸液中細胞數目不低于1×107 L-1，如果細胞數目很少要進(jìn)行離心再懸浮于少量培養液中。

　　2.要求細胞懸液中的細胞分散良好，否則影響計數準確性。

　　3.取樣計數前，應充分混勻細胞懸液，尤其時(shí)多次取樣計數時(shí)更要注意每次取樣都要混勻，以求計數準確。

　　4.數細胞的原則是只數完整的細胞，若細胞聚集成團時(shí)，只按照1個(gè)細胞計算。如果細胞壓在格線(xiàn)上時(shí)，則只計上線(xiàn)，不計下線(xiàn)，只計右線(xiàn)，不計左線(xiàn)。

　　5.操作時(shí)，注意蓋片下不能有氣泡，也不能讓?xiě)乙毫魅肱赃叢壑?，否則要重新計數。