ATCC細胞的培養液配制簡(jiǎn)介

　　ATCC細胞培養液中的氨基酸除了13種細胞生長(cháng)所必須的氨基酸外，往往加入一些非必需的氨基酸以促進(jìn)細胞的生長(cháng)。在必需的氨基酸中，L-谷氨酰胺在溶液中不穩定（在4℃培養溶液中半衰期為3個(gè)星期，37℃中為1個(gè)星期），需要在使用時(shí)加入。所有培養器皿均需清水沖洗2-3d，達兩次ddH2O，每遍洗刷3-4次，加塞包裝，置于烤箱中干燥消毒，于培養前1天進(jìn)行。

　　ATCC細胞培養液的配制明細：

　　1.解剖液：以無(wú)機鹽（去除Ca2+，Mg2+）加葡萄糖配制成PBS緩沖液，保持一定的滲透壓和pH值。

　　2.基礎培養基（MEM）：主要為多種氨基酸，加入葡萄糖，雙蒸餾水溶解。

　　3.接種培養液：用于胰酶消化后的細胞分散，做成細胞懸液，其成分為MEM含1%谷氨酰胺，另加入10%馬血清，當天配制。

　　4.維持培養液：接種后24h，全部換成此液，后每2周換一次，每次換1/2。其成分為MEM中含5%馬血清，1%谷氨酰胺，及適量的支持性營(yíng)養物質(zhì)。