ATCC細胞培養常出現的技術(shù)問(wèn)題解答

　　對于A(yíng)TCC細胞的培養常出現的技術(shù)問(wèn)題我們如何找出答案？

　　1.培養用液pH對細胞生長(cháng)有何影響？

　　由于大多數細胞適宜pH為7.2-7.4，偏離此范圍對細胞將產(chǎn)生有害的影響。各種細胞對pH的要求也不*相同，原代培養細胞一般對pH變動(dòng)耐受差，無(wú)限細胞系耐受力強?？傮w來(lái)說(shuō)，細胞耐酸性比耐堿性強一些，偏酸環(huán)境中更利于細胞生長(cháng)。因此在配制培養用液時(shí)，可把液體的pH稍微調得偏酸一些。液體在經(jīng)過(guò)0.10um或0.22um濾膜過(guò)濾時(shí)，溶液的pH還會(huì )向上浮動(dòng)0.2左右。

　　2.何為傳代培養？

　　在進(jìn)行傳代時(shí)，如果是懸浮細胞，只需簡(jiǎn)單稀釋即可，若需*更換培養液只需低速離心沉淀，再懸浮于合適的培養液中即可。一般細胞每毫升接種數量為5´104-8´105個(gè)，傳代密度太低，細胞容易死亡，表現出細胞在達到增長(cháng)前有較長(cháng)的滯留期。在培養過(guò)程中，培養液會(huì )由于pH下降而呈現黃色，表明細胞已經(jīng)達到最大密度需要換液或進(jìn)行傳代培養。如果是單層貼壁的細胞，等長(cháng)滿(mǎn)培養瓶表面，即可進(jìn)行傳代，多數細胞需用胰蛋白酶處理將細胞從生長(cháng)物表面分離下來(lái)，以促進(jìn)傳代培養。

　　3.細胞培養的環(huán)境有何要求？

　?、贌o(wú)污染環(huán)境

　　培養環(huán)境無(wú)毒和無(wú)菌是保證細胞生存的首要條件。當細胞放置于體外培養時(shí)，與體內相比細胞丟失了對微生物和有毒物的防御能力，一旦被污染或自身代謝物質(zhì)積累等，可導致細胞死亡。因此在進(jìn)行培養中，保持細胞生存環(huán)境無(wú)污染、代謝物及時(shí)清除等，是維持細胞生存的基本條件。

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