Gibco血清的培養基配制及前處理說(shuō)明

　　一、合成培養基的配制

　　1.根據細胞目錄中的說(shuō)明，按下表選擇合適品牌及貨號的培養基干粉，用適量超純水充分溶解。

　　2.按要求添加碳酸氫鈉、谷氨酸鈉、HEPES等，充分攪拌使之溶解。

　　3.調pH至7.2左右。

　　4.加水至最終體積。

　　5.在超凈臺中對溶液進(jìn)行濾過(guò)除菌，分裝入250 mL或500 mL玻璃瓶中，用翻帽塞塞緊瓶口。

　　6.瓶口封好，4℃冰箱貯存。

　　二、生長(cháng)培養基的配制

　　除無(wú)血清培養之外，各種合成培養基在使用前需加入一定量的血清和抗菌素。

　　培養基分裝成小瓶(100-200 mL)以便使用，翻帽塞塞緊瓶口。

　　按如下比例配制：基本培養基占80%-90%，血清占10%-20%。按1%體積分數加入雙抗貯存液(青霉素+鏈霉素)，使青霉素和鏈霉素的終濃度分別為100 U/mL和100μ/mL。

　　三、Gibco血清的處理

　　市場(chǎng)上出售的血清一般做了滅菌處理，但在使用前還應做熱滅活處理，即通過(guò)加熱的方法破壞補體(近來(lái)也有觀(guān)點(diǎn)認為熱滅活處理是不必要的)。

　　1.將血清加熱至56℃并保持30 min，其間要不時(shí)輕輕晃動(dòng)，使受熱均勻，防止沉淀析出。

　　2.處理后的血清貯存于4℃。

　　3.血清在使用前最好進(jìn)行篩選以掌握血清的質(zhì)量。