發(fā)布時(shí)間: 2021-08-13 點(diǎn)擊次數: 874次
Gibco血清是細胞培養中重要的元素之一,今天我們?yōu)榇蠹艺砹艘恍┭迨褂迷趯?shí)驗室里常會(huì )遇到的問(wèn)題供參考:
1.血清保存的好方法是什么?
建議血清應保存在-5至-2O℃環(huán)境下。然而若存放于4℃時(shí),請勿超過(guò)一個(gè)月。若一次無(wú)法用完一瓶,建議無(wú)菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。
2.血清的解凍技巧是什么?
建議將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意融解過(guò)程中必須規則地搖晃均勻。血清解凍后若發(fā)現有絮狀沉淀物有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會(huì )存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物并不影響血清本身的質(zhì)量。
若欲去除這些絮狀沉淀物,可將血清分裝至無(wú)菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著(zhù)加入培養基內一起過(guò)濾。不建議以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會(huì )阻塞過(guò)濾膜。
3.為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學(xué)研究,培養ES細胞,昆蟲(chóng)細胞和平滑肌細胞時(shí),推薦使用熱滅活血清。
實(shí)驗顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對細胞的生長(cháng)只有微小的促進(jìn),或*沒(méi)有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,而造成細胞生長(cháng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì )顯著(zhù)的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀(guān)察,像是“小黑點(diǎn)”,常會(huì )讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì )使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。
因此建議大家若非必須,可不需要做熱處理這一步。如此一來(lái)不但節省您寶貴的時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量。